pEE12.4 GS系統(tǒng) CHO 細(xì)胞蛋白表達(dá)載體 抗體表達(dá)質(zhì)粒 BioVector NTCC質(zhì)粒載體菌種細(xì)胞基因保藏中心
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pEE 12.4載體簡(jiǎn)介 Glutamine Synthetase(GS, 谷氨酰胺合成酶)基因表達(dá)系統(tǒng),利用谷氨酰胺合成酶篩選標(biāo)記,能夠高水平的在哺乳細(xì)胞內(nèi)表達(dá)目的基因。 GS酶是生物體內(nèi)以谷氨酸和氨為底物合成谷氨酰胺的酶。GS酶的活性能夠被甲硫氨酸砜亞胺(methionine sulphoximine,MSX)選擇性的抑制。一些哺乳動(dòng)物細(xì)胞,例如小鼠骨髓瘤細(xì)胞(NSO細(xì)胞系)無(wú)法表達(dá)GS,所以在不添加谷氨酰胺的情況下,細(xì)胞將無(wú)法生長(zhǎng)。對(duì)于這些細(xì)胞系,在無(wú)谷氨酰胺的培養(yǎng)基內(nèi),一個(gè)轉(zhuǎn)染的GS基因可以作為一個(gè)篩選標(biāo)記。其他的一些細(xì)胞系,例如CHO-KI,能夠產(chǎn)生內(nèi)源性的GS酶。對(duì)于這些細(xì)胞,在無(wú)谷氨酰胺培養(yǎng)基內(nèi),在高水平足夠抑制GS酶合成的MSX(甲硫氨酸砜亞胺)的作用下,可以對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)提供一個(gè)選擇壓力。 1992年,Bebbington等首次報(bào)道了使用GS基因細(xì)胞系統(tǒng)表達(dá)重組的抗體。該載體能夠被用來(lái)構(gòu)建快速,高產(chǎn)量,穩(wěn)定的單克隆抗體表達(dá)細(xì)胞系。 載體名稱: pEE12.4, pEE 12.4 質(zhì)粒類(lèi)型: 哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)載體 高拷貝/低拷貝: 高拷貝 啟動(dòng)子: hCMV-MIE 克隆方法: 多克隆位點(diǎn),限制性內(nèi)切酶 載體大小: 7569 bp 5' 測(cè)序引物及序列: CMV-Forward 3' 測(cè)序引物及序列: -- 載體抗性: 氨芐 篩選標(biāo)記: GS (Glutamine Synthetase, 谷氨酰胺合成酶) 備注: 配套細(xì)胞是NSO細(xì)胞或者CHOK1SV細(xì)胞 產(chǎn)品目錄號(hào): -- 穩(wěn)定性: 穩(wěn)定表達(dá)
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