pLV-EF1a-mCherry-N vector

-BioVector NTCC質粒載體菌種細胞蛋白抗體基因保藏中心

載體特性
類型：慢病毒基因過表達載體
基因啟動子：EF1a promoter
熒光標簽：mCherry
真核細胞篩選抗性：Puromycin
原核抗性：Ampicillin

pLV-EF1a-mCherry-N載體是基于HIV1的慢病毒基因過表達載體。該載體的多克隆位點位于mCherry基因上游，在EF1a啟動子驅動下表達目的基因和mCherry融合蛋白。EF1a啟動子來自人類EEF1A基因，可在多數種類細胞中穩定表達，尤其是某些CMV啟動子會發生沉默的細胞如干細胞等。PGK啟動子驅動表達Puromycin抗性基因。利用本載體包裝的慢病毒將表達Puromycin抗性基因，可以方便地使用Puromycin篩選出穩定過表達目的基因的細胞。同時表達帶有mCherry熒光標簽的目的基因，可以很容易的對病毒感染效率以及目的基因的表達和定位進行監測。
pLV-EF1a-mCherry-N載體包含了生產慢病毒所必須的病毒原件以及提高病毒滴度及基因表達效率的原件。載體結構緊湊，在保證產生高滴度病毒的同時，載體對外源基因片段的容量達到3kb，多數哺乳動物基因都可以在pLV-EF1a-mCherry-N中成功表達。

使用說明
pLV-EF1a-mCherry-N載體用于在包括原代培養細胞在內的各種哺乳動物細胞中穩定表達外源基因和Puromycin抗性基因。pLV-EF1a-mCherry-N載體與包裝載體共轉染HEK293T細胞后，產生高滴度復制缺陷的慢病毒顆粒，可以直接用于感染細胞或者純化濃縮后感染細胞。

mCherry最大激發波長：587nm
mCherry最大發射波長：610nm

原核培養特性
pLV-EF1a-mCherry-N載體為高拷貝質粒，帶有氨芐抗性基因，可以在含有100 μg/ml氨芐抗生素的LB培養基中增殖。

宿主菌可以采用DH5α，JM109，TOP10等常見大腸桿菌菌種。