- BioVector NTCC典型培養(yǎng)物保藏中心
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Product Information
Order ID |
Name |
Description |
Biovector-01128569 |
293-F cells |
293-F cells. 1 vial.1x10^6 cells. Storage: Liquid Nitrogen |
293-F懸浮細(xì)胞源自293細(xì)胞株。用于高表達(dá)蛋白。293-F懸浮細(xì)胞增殖能力取決于細(xì)胞取材、培養(yǎng)技術(shù)、培養(yǎng)條件等綜合因素。請(qǐng)按照正確的培養(yǎng)方法來解凍、傳代,以此保證細(xì)胞具備良好的增殖能力,方便您的后繼研究順利進(jìn)行。
質(zhì)量控制:
本細(xì)胞經(jīng)過了檢測(cè),不含有細(xì)菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體。
培養(yǎng)條件:
37℃,8% CO2,PH值7.2~7.4,125rpm,無菌恒溫培養(yǎng)。
用途:
本產(chǎn)品只提供給進(jìn)一步的科研使用,不可應(yīng)用于治療等其他方面。
細(xì)胞相關(guān)操作:
293F細(xì)胞復(fù)蘇
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基(FreeStyle™ 293 Expression Medium);
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,用血小球計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),按細(xì)胞密度4-5×105/ml接種到25ml無菌搖瓶中(帶空氣過濾通氣孔的搖瓶);
5.搖瓶置于37°C,8% CO2的培養(yǎng)箱中的搖瓶架上,125rpm培養(yǎng)。
293F細(xì)胞傳代
1.取細(xì)胞計(jì)數(shù)(詳見293F細(xì)胞凍存),當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到1.0-3.0×106/ml時(shí)(最好不要超過3.0×106cells/ml),可傳代;
2.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基(FreeStyle™ 293 Expression Medium);
3.在超凈臺(tái)中,加適量預(yù)熱好的培養(yǎng)基到無菌搖瓶中,以細(xì)胞終密度為6-7×105/ml接種細(xì)胞(也可1000rpm,5min離心后棄上清,用預(yù)熱好的培養(yǎng)基重懸并調(diào)整細(xì)胞密度為6-7×105/ml),轉(zhuǎn)移到無菌搖瓶中;
4. 搖瓶置于37°C,8% CO2的培養(yǎng)箱中的搖瓶架上,125rpm培養(yǎng)。
注:293F細(xì)胞對(duì)氧的要求較高,因此,懸浮培養(yǎng)必須具有高表面積體積比,否則細(xì)胞的生長會(huì)受到抑制。培養(yǎng)基的體積不能超過搖瓶的五分之二;即100毫升的搖瓶不能超過40ml培養(yǎng)基,250ml搖瓶不能超過100ml培養(yǎng)基。
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