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pEE 6.4載體基本信息
| 出品公司: | Lonza biologics |
|---|---|
| 載體名稱: | pEE6.4, pEE 6.4 |
| 質粒類型: | GS系統哺乳動物細胞蛋白表達載體，抗體表達載體 |
| 高拷貝/低拷貝: | 高拷貝 |
| 啟動子: | hCMV-MIE |
| 克隆方法: | 多克隆位點，限制性內切酶 |
| 載體大小: | -- |
| 5' 測序引物及序列: | -- |
| 3' 測序引物及序列: | -- |
| 載體標簽: | -- |
| 載體抗性: | 氨芐 |
| 篩選標記: | GS (Glutamine Synthetase, 谷氨酰胺合成酶) |
| 備注: | 配套細胞是NSO細胞或者CHOK1SV細胞 |
| 產品目錄號: | -- |
| 穩定性: | 穩定表達 |
| 組成型: | -- |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
pEE 6.4載體質粒圖譜和多克隆位點信息
pEE 6.4載體簡介
Lonza生物公司的Glutamine Synthetase(GS, 谷氨酰胺合成酶)基因表達系統載體pEE6.4載體，利用谷氨酰胺合成酶篩選標記，能夠高水平的在哺乳細胞內表達目的基因。
GS酶是生物體內以谷氨酸和氨為底物合成谷氨酰胺的酶。GS酶的活性能夠被甲硫氨酸砜亞胺（methionine sulphoximine，MSX）選擇性的抑制。一些哺乳動物細胞，例如小鼠骨髓瘤細胞(NSO細胞系)無法表達GS，所以在不添加谷氨酰胺的情況下， 細胞將無法生長。對于這些細胞系，在無谷氨酰胺的培養基內，一個轉染的GS基因可以作為一個篩選標記。其他的一些細胞系，例如CHO-KI，能夠產生內源 性的GS酶。對于這些細胞，在無谷氨酰胺培養基內，在高水平足夠抑制GS酶合成的MSX（甲硫氨酸砜亞胺）的作用下，可以對細胞的生長提供一個選擇壓力。
1992年，Bebbington等首次報道了使用GS基因細胞系統表達重組的抗體。該載體能夠被用來構建快速，高產量，穩定的單克隆抗體表達細胞系。
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