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載體基本信息
出品公司: | Promega |
---|---|
載體名稱: | pRL-TK |
質粒類型: | 哺乳細胞表達;啟動子增強子報告系統 |
高拷貝/低拷貝: | -- |
啟動子: | HSV TK |
克隆方法: | 多克隆位點,限制性內切酶 |
載體大小: | 4045bp |
5' 測序引物及序列: | -- |
3' 測序引物及序列: | -- |
載體標簽: | -- |
載體抗性: | 氨芐青霉素(Ampicillin) |
篩選標記: | -- |
備注: | pRL-TK是海腎熒光素酶報告載體,含有SV40增強子。 |
產品目錄號: | E2241 |
穩定性: | 瞬表達 |
組成型: | 組成型 |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
載體質粒圖譜和多克隆位點信息
載體簡介
pRL 家族是野生型海腎螢光素酶(Rluc) 報告基因對照載體。pRL 載體提供組成型表達的海腎螢光素酶,可與一個螢火蟲螢 光素酶載體聯合共轉染哺乳動物細胞。海腎螢光素酶的表達為實驗的螢火蟲螢光素酶報告基因正態化提供內對照值。pRL 載 體包含一個編碼海腎螢光素酶(Rluc) 的cDNA, 這個cDNA 從珊瑚蟲類腔腸動物海腎(Renilla reniformis) 中克隆而來。目前 有四個不同的啟動子構造。其中HSV- 胸腺嘧啶核苷激酶啟動子(pRL-TK) 相對較弱, 更適用于海腎螢光素酶報告基因載體 的中性組成型表達。早期SV40 增強子/ 啟動子區域(pRL-SV40) 和CMV 極早期增強子/ 啟動子區域(pRL-CMV)一般提供高 水平轉錄,因此可能不適于作為實驗載體帶有強調控元件的共報告基因。一般我們建議在將要應用的目標細胞中驗證某一 個特定共報告基因的性能。除了經過修飾的Rluc 報告基因外,所有pRL載體均是從dam–/dcm– E. coli K 宿主菌株分離而 來,這樣可以使用對dam 或 dcm 甲基化敏感的限制性內切酶進行消化。
載體序列
LOCUS pRL-TK 4045 bp DNA SYN DEFINITION pRL-TK ACCESSION KEYWORDS SOURCE ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors. FEATURES Location/Qualifiers source 1..4045 /organism="pRL-TK" /mol_type="other DNA" CDS 332..796 /label="ORF frame 2" promoter complement(532..680) /label="TATA_promoter" promoter 543..758 /label="TK_promoter" misc_feature 829..961 /label="chim_int" promoter 1006..1024 /label="T7_promoter" CDS 1034..1969 /label="ORF frame 2" terminator complement(1997..2116) /label="SV40_PA_terminator" misc_feature complement(2011..2030) /label="EBV_rev_primer" promoter 2289..2317 /label="AmpR_promoter" gene 2359..3219 /label="Ampicillin" /gene="Ampicillin" CDS 2359..3219 /label="ORF frame 1" rep_origin 3374..3993 /label="pBR322_origin" ORIGIN 1 AGATCTAAAT GAGTCTTCGG ACCTCGCGGG GGCCGCTTAA GCGGTGGTTA GGGTTTGTCT 61 GACGCGGGGG GAGGGGGAAG GAACGAAACA CTCTCATTCG GAGGCGGCTC GGGGTTTGGT 121 CTTGGTGGCC ACGGGCACGC AGAAGAGCGC CGCGATCCTC TTAAGCACCC CCCCGCCCTC 181 CGTGGAGGCG GGGGTTTGGT CGGCGGGTGG TAACTGGCGG GCCGCTGACT CGGGCGGGTC 241 GCGCGCCCCA GAGTGTGACC TTTTCGGTCT GCTCGCAGAC CCCCGGGCGG CGCCGCCGCG 301 GCGGCGACGG GCTCGCTGGG TCCTAGGCTC CATGGGGACC GTATACGTGG ACAGGCTCTG 361 GAGCATCCGC ACGACTGCGG TGATATTACC GGAGACCTTC TGCGGGACGA GCCGGGTCAC 421 GCGGCTGACG CGGAGCGTCC GTTGGGCGAC AAACACCAGG ACGGGGCACA GGTACACTAT 481 CTTGTCACCC GGAGGCGCGA GGGACTGCAG GAGCTTCAGG GAGTGGCGCA GCTGCTTCAT 541 CCCCGTGGCC CGTTGCTCGC GTTTGCTGGC GGTGTCCCCG GAAGAAATAT ATTTGCATGT 601 CTTTAGTTCT ATGATGACAC AAACCCCGCC CAGCGTCTTG TCATTGGCGA ATTCGAACAC 661 GCAGATGCAG TCGGGGCGGC GCGGTCCCAG GTCCACTTCG CATATTAAGG TGACGCGTGT 721 GGCCTCGAAC ACCGAGCGAC CCTGCAGCGA CCCGCTTAAA AGCTTGATTC TTCTGACACA 781 ACAGTCTCGA ACTTAAGCTG CAGAAGTTGG TCGTGAGGCA CTGGGCAGGT AAGTATCAAG 841 GTTACAAGAC AGGTTTAAGG AGACCAATAG AAACTGGGCT TGTCGAGACA GAGAAGACTC 901 TTGCGTTTCT GATAGGCACC TATTGGTCTT ACTGACATCC ACTTTGCCTT TCTCTCCACA 961 GGTGTCCACT CCCAGTTCAA TTACAGCTCT TAAGGCTAGA GTACTTAATA CGACTCACTA 1021 TAGGCTAGCC ACCATGACTT CGAAAGTTTA TGATCCAGAA CAAAGGAAAC GGATGATAAC 1081 TGGTCCGCAG TGGTGGGCCA GATGTAAACA AATGAATGTT CTTGATTCAT TTATTAATTA 1141 TTATGATTCA GAAAAACATG CAGAAAATGC TGTTATTTTT TTACATGGTA ACGCGGCCTC 1201 TTCTTATTTA TGGCGACATG TTGTGCCACA TATTGAGCCA GTAGCGCGGT GTATTATACC 1261 AGACCTTATT GGTATGGGCA AATCAGGCAA ATCTGGTAAT GGTTCTTATA GGTTACTTGA 1321 TCATTACAAA TATCTTACTG CATGGTTTGA ACTTCTTAAT TTACCAAAGA AGATCATTTT 1381 TGTCGGCCAT GATTGGGGTG CTTGTTTGGC ATTTCATTAT AGCTATGAGC ATCAAGATAA 1441 GATCAAAGCA ATAGTTCACG CTGAAAGTGT AGTAGATGTG ATTGAATCAT GGGATGAATG 1501 GCCTGATATT GAAGAAGATA TTGCGTTGAT CAAATCTGAA GAAGGAGAAA AAATGGTTTT 1561 GGAGAATAAC TTCTTCGTGG AAACCATGTT GCCATCAAAA ATCATGAGAA AGTTAGAACC 1621 AGAAGAATTT GCAGCATATC TTGAACCATT CAAAGAGAAA GGTGAAGTTC GTCGTCCAAC 1681 ATTATCATGG CCTCGTGAAA TCCCGTTAGT AAAAGGTGGT AAACCTGACG TTGTACAAAT 1741 TGTTAGGAAT TATAATGCTT ATCTACGTGC AAGTGATGAT TTACCAAAAA TGTTTATTGA 1801 ATCGGACCCA GGATTCTTTT CCAATGCTAT TGTTGAAGGT GCCAAGAAGT TTCCTAATAC 1861 TGAATTTGTC AAAGTAAAAG GTCTTCATTT TTCGCAAGAA GATGCACCTG ATGAAATGGG 1921 AAAATATATC AAATCGTTCG TTGAGCGAGT TCTCAAAAAT GAACAATAAT TCTAGAGCGG 1981 CCGCTTCGAG CAGACATGAT AAGATACATT GATGAGTTTG GACAAACCAC AACTAGAATG 2041 CAGTGAAAAA AATGCTTTAT TTGTGAAATT TGTGATGCTA TTGCTTTATT TGTAACCATT 2101 ATAAGCTGCA ATAAACAAGT TAACAACAAC AATTGCATTC ATTTTATGTT TCAGGTTCAG 2161 GGGGAGGTGT GGGAGGTTTT TTAAAGCAAG TAAAACCTCT ACAAATGTGG TAAAATCGAT 2221 AAGGATCCAG GTGGCACTTT TCGGGGAAAT GTGCGCGGAA CCCCTATTTG TTTATTTTTC 2281 TAAATACATT CAAATATGTA TCCGCTCATG AGACAATAAC CCTGATAAAT GCTTCAATAA 2341 TATTGAAAAA GGAAGAGTAT GAGTATTCAA CATTTCCGTG TCGCCCTTAT TCCCTTTTTT 2401 GCGGCATTTT GCCTTCCTGT TTTTGCTCAC CCAGAAACGC TGGTGAAAGT AAAAGATGCT 2461 GAAGATCAGT TGGGTGCACG AGTGGGTTAC ATCGAACTGG ATCTCAACAG CGGTAAGATC 2521 CTTGAGAGTT TTCGCCCCGA AGAACGTTTT CCAATGATGA GCACTTTTAA AGTTCTGCTA 2581 TGTGGCGCGG TATTATCCCG TATTGACGCC GGGCAAGAGC AACTCGGTCG CCGCATACAC 2641 TATTCTCAGA ATGACTTGGT TGAGTACTCA CCAGTCACAG AAAAGCATCT TACGGATGGC 2701 ATGACAGTAA GAGAATTATG CAGTGCTGCC ATAACCATGA GTGATAACAC TGCGGCCAAC 2761 TTACTTCTGA CAACGATCGG AGGACCGAAG GAGCTAACCG CTTTTTTGCA CAACATGGGG 2821 GATCATGTAA CTCGCCTTGA 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ACCGGATAAG GCGCAGCGGT CGGGCTGAAC GGGGGGTTCG 3721 TGCACACAGC CCAGCTTGGA GCGAACGACC TACACCGAAC TGAGATACCT ACAGCGTGAG 3781 CTATGAGAAA GCGCCACGCT TCCCGAAGGG AGAAAGGCGG ACAGGTATCC GGTAAGCGGC 3841 AGGGTCGGAA CAGGAGAGCG CACGAGGGAG CTTCCAGGGG GAAACGCCTG GTATCTTTAT 3901 AGTCCTGTCG GGTTTCGCCA CCTCTGACTT GAGCGTCGAT TTTTGTGATG CTCGTCAGGG 3961 GGGCGGAGCC TATGGAAAAA CGCCAGCAAC GCGGCCTTTT TACGGTTCCT GGCCTTTTGC 4021 TGGCCTTTTG CTCACATGGC TCGAC
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