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Biovector,Inc質粒載體菌株細胞株基因保藏中心列表網址http://www.Biovector.net
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產品分類
pet32a載體基本信息
EMD Biosciences(Novagen) |
pET32a, pet 32a |
大腸桿菌蛋白表達 |
高 |
多克隆位點,限制性內切酶 |
5900bp |
T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' |
thioredoxin (N端); His (中間和C端) |
氨芐 |
pET32a載體用于表達可溶性,具有活性功能的蛋白;pET-32a(+)載體具有N端Thrombin(凝血酶)酶切位點,N端腸激酶酶切位點。pET32啊,pET32b,pET32c載體的差異主要是在于多克隆位點,其他地方完全一致。 |
69015-3 |
瞬時表達 |
組成型 |
非病毒 |
pet32a載體質粒圖譜和多克隆位點信息
pet32a載體簡介
pET32系列載體是設計用來克隆構建和高水平融合表達表達帶有109個氨基酸Trx標簽的蛋白質序列。將基因插入到載體的多克隆位點,能夠獲得融合表達蛋白質。同時融合蛋白包含有His標簽和S標簽,這些可以用于蛋白表達檢測和純化過程。
載體的多克隆位點見上面的圖譜。需要注意的是圖譜中的核苷酸編碼順序是以pBR322載體的復制方向為正方向,所以T7表達區域在圖譜中是處于反向的位置。T7 RNA聚合酶啟動的克隆和表達區域在質粒圖譜中也被標注了出來。質粒的F1復制子是被定向的,所以在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產生,并啟動蛋白表達,同時蛋白表達將被T7終止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下終止蛋白翻譯。
pet32a載體序列
SOURCE
ORGANISM
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biofeng.com/
COMMENT ORIGDB|GenBank
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
FEATURES Location/Qualifiers
promoter complement(764..780)
/vntifkey="30"
/label=T7\promoter
misc_signal complement(366..692)
/vntifkey="87"
/label=trx\tag
protein_bind complement(327..344)
/vntifkey="31"
/label=His\tag
misc_feature complement(249..293)
/vntifkey="21"
/label=S\tag
protein_bind 140..157
/vntifkey="31"
/label=His\tag
terminator complement(26..72)
/vntifkey="43"
/label=T7\terminator
CDS 1171..2250
/vntifkey="4"
/label=lac\I
rep_origin complement(3684..3684)
/vntifkey="33"
/label=ColE1\pBR322\origin
CDS complement(4445..5302)
/vntifkey="4"
/label=bla\(amp)\sequence
rep_origin complement(5434..5889)
/vntifkey="33"
/label=f1\origin
CDS complement(737..761)
/vntifkey="4"
/label=lac\operator
protein_bind complement(219..233)
/vntifkey="31"
/label=enterokinase
protein_bind complement(300..317)
/vntifkey="31"
/label=thrombin
BASE COUNT 1391 a 1564 c 1560 g 1385 t
ORIGIN
1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
121 tgttagcagc cggatctcag tggtggtggt ggtggtgctc gagtgcggcc gcaagcttgt
181 cgacggagct cgaattcgga tccgatatca gccatggcct tgtcgtcgtc gtcggtaccc
241 agatctgggc tgtccatgtg ctggcgttcg aatttagcag cagcggtttc tttcatacca
301 gaaccgcgtg gcaccagacc agaagaatga tgatgatgat ggtgcatatg gccagaacca
361 gaaccggcca ggttagcgtc gaggaactct ttcaactgac ctttagacag tgcacccact
421 ttggttgccg ccacttcacc gtttttgaac agcagcagag tcgggatacc acggatgcca
481 tatttcggcg cagtgccagg gttttgatcg atgttcagtt ttgcaacggt cagtttgccc
541 tgatattcgt cagcgatttc atccagaatc ggggcgatca ttttgcacgg accgcaccac
601 tctgcccaga aatcgacgag gatcgccccg tccgctttga gtacatccgt gtcaaaactg
661 tcgtcagtca ggtgaataat tttatcgctc atatgtatat ctccttctta aagttaaaca
721 aaattatttc tagaggggaa ttgttatccg ctcacaattc ccctatagtg agtcgtatta
781 atttcgcggg atcgagatcg atctcgatcc tctacgccgg acgcatcgtg gccggcatca
841 ccggcgccac aggtgcggtt gctggcgcct atatcgccga catcaccgat ggggaagatc
901 gggctcgcca cttcgggctc atgagcgctt gtttcggcgt gggtatggtg gcaggccccg
961 tggccggggg actgttgggc gccatctcct tgcatgcacc attccttgcg gcggcggtgc
1021 tcaacggcct caacctacta ctgggctgct tcctaatgca ggagtcgcat aagggagagc
1081 gtcgagatcc cggacaccat cgaatggcgc aaaacctttc gcggtatggc atgatagcgc
1141 ccggaagaga gtcaattcag ggtggtgaat gtgaaaccag taacgttata cgatgtcgca
1201 gagtatgccg gtgtctctta tcagaccgtt tcccgcgtgg tgaaccaggc cagccacgtt
1261 tctgcgaaaa cgcgggaaaa agtggaagcg gcgatggcgg agctgaatta cattcccaac
1321 cgcgtggcac aacaactggc gggcaaacag tcgttgctga ttggcgttgc cacctccagt
1381 ctggccctgc acgcgccgtc gcaaattgtc gcggcgatta aatctcgcgc cgatcaactg
1441 ggtgccagcg tggtggtgtc gatggtagaa cgaagcggcg tcgaagcctg taaagcggcg
1501 gtgcacaatc ttctcgcgca acgcgtcagt gggctgatca ttaactatcc gctggatgac
1561 caggatgcca ttgctgtgga agctgcctgc actaatgttc cggcgttatt tcttgatgtc
1621 tctgaccaga cacccatcaa cagtattatt ttctcccatg aagacggtac gcgactgggc
1681 gtggagcatc tggtcgcatt gggtcaccag caaatcgcgc tgttagcggg cccattaagt
1741 tctgtctcgg cgcgtctgcg tctggctggc tggcataaat atctcactcg caatcaaatt
1801 cagccgatag cggaacggga aggcgactgg agtgccatgt ccggttttca acaaaccatg
1861 caaatgctga atgagggcat cgttcccact gcgatgctgg ttgccaacga tcagatggcg
1921 ctgggcgcaa tgcgcgccat taccgagtcc gggctgcgcg ttggtgcgga catctcggta
1981 gtgggatacg acgataccga agacagctca tgttatatcc cgccgttaac caccatcaaa
2041 caggattttc gcctgctggg gcaaaccagc gtggaccgct tgctgcaact ctctcagggc
2101 caggcggtga agggcaatca gctgttgccc gtctcactgg tgaaaagaaa aaccaccctg
2161 gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg attcattaat gcagctggca
2221 cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac gcaattaatg taagttagct
2281 cactcattag gcaccgggat ctcgaccgat gcccttgaga gccttcaacc cagtcagctc
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